Hoe een eiwit te denatureren

Misschien wil je een eiwit denatureren voor een wetenschappelijk project, of heb je misschien wel eens gelezen over gedenatureerd voedsel en wil je weten hoe ze werken. Denaturatie is het proces waarbij een eiwit zijn vorm en structuur verliest door acties van externe krachten die warmte, zuren en oplosmiddelen bevatten. De exacte manier waarop u een eiwit denatureert, is afhankelijk van het specifieke eiwit waarmee u wilt werken, omdat ze allemaal verschillende denatureringsmiddelen op verschillende niveaus vereisen. De meeste eiwitten kunnen echter worden gedenatureerd als u weet wat u in de eiwitomgeving moet veranderen.

Inhoud

Stappen

Methode 1een eiwit denatureren
Methode 2renaturaliseren van eiwitten

stappen

Methode 1
Een eiwit denatureren

Titel afbeelding Denature a Protein Step 1

Gebruik de hitte Warmte is een van de gemakkelijkste manieren en de meest gebruikelijke manier om een eiwit te denatureren. Wanneer het eiwit in kwestie in voedsel aanwezig is, zal de eenvoudige handeling van het koken van voedsel eiwitten denatureren. Veel eiwitten kunnen worden gedenatureerd door ze bloot te stellen aan een temperatuur van 100 ° C (212 ° F) of hoger. Hierdoor kunnen de eiwitten coaguleren en hun oplosbaarheid verminderen.

De duur van de belichting hangt af van wat u blootstelt aan warmte. Een ei kan bijvoorbeeld in 5 minuten in een koekenpan op middelhoog vuur worden gekookt, terwijl een gebraden vlees uren kan duren om in een oven te koken.

Titel afbeelding Denature a Protein Step 2

Alcohol toepassen. Alcohol onderbreekt de waterstofbruggen die tussen de amidegroepen voorkomen. Wanneer een eiwit wordt blootgesteld aan een alcoholoplossing, vormen de alcoholmoleculen nieuwe bindingen met de eiwitketen. Gebruik een alcoholoplossing van 70% om de celwand van de bacteriën af te breken en het eiwit te denatureren.

Geconcentreerde alcoholen kunnen gevaarlijk zijn, omdat ze ontvlambaar en giftig zijn. Gebruik altijd complete veiligheidsuitrusting, inclusief handschoenen en oogbescherming, en behandel ze in een veilige omgeving met een gecontroleerde temperatuur.

Titel afbeelding Denature a Protein Step 3

Verander de pH. De interne structuur van een eiwit kan worden afgebroken als de omgeving erg zuur of erg alkalisch is, omdat ze de ionische bindingen onderbreken die de zoutbruggen van het eiwit bij elkaar houden. Voeg een zure of basische oplossing toe aan het eiwit. De omgeving moet een pH hoger dan 10 of lager dan 4 hebben om denaturatie te bevorderen.

Titel afbeelding Denature a Protein Step 4

Test met zouten van zware metalen. Zware metalen kunnen de bindingen in het eiwit veranderen, waardoor het zijn structuur verliest. De zouten van zware metalen zoals kwik en lood kunnen worden gebruikt om verschillende eiwitten te denatureren. Deze zouten zijn verkrijgbaar bij de meeste chemische leveranciers en dienen altijd met de nodige voorzichtigheid te worden gebruikt en met geschikte veiligheidsuitrusting, inclusief handschoenen en oogbescherming.

Methode 2
Renaturaliseren van eiwitten

Titel afbeelding Denature a Protein Step 5

Het bepaalt of een eiwit opnieuw kan worden gevouwen. Sommige vormen van denaturatie zijn permanent, terwijl andere vormen ongedaan kunnen worden gemaakt. Het koken van een ei of een vlees kan bijvoorbeeld niet ongedaan worden gemaakt, maar een eiwit dat is blootgesteld aan een hoge pH kan zijn vorm terugkrijgen wanneer het in een meer neutrale omgeving wordt geplaatst.

Titel afbeelding Denature a Protein Step 6

Elimineert de denaturerende factor. Breng de omgeving van het eiwit terug naar stasis en elimineer het denaturerende element. Verwijder bijvoorbeeld het zuur of de base of herintroduceer het eiwit op een redelijker temperatuur.

Titel afbeelding Denature a Protein Step 7

Gebruik een renaturatiepakket. Veel leveranciers van laboratoriumbenodigdheden verkopen naturalisatiesets waarmee u de beste parameters kunt selecteren om renaturatie aan te moedigen. Deze kits kunnen met name handig zijn als u met eiwitten in een laboratorium of in een experimentele omgeving werkt.

Delen op sociale netwerken:

Verwant