Hoe maak je een weefselkweek

Weefselkweek is een techniek die het mogelijk maakt om nieuwe cellen uit een weefsel te verkrijgen en hun groei buiten het organisme te bevorderen. Om dit te bereiken is het noodzakelijk om een kunstmatig medium te vormen waarin zich de cellen kunnen ontwikkelen. Eenmaal gecultiveerd kunnen deze cellen worden gebruikt om verschillende soorten onderzoek uit te voeren, zoals studies over weefselbiochemie en de ontwikkeling van geneesmiddelen.

Inhoud

Stappen
Deel 1
Deel 2

stappen

Deel 1

Bereid het gewas voor

Titel afbeelding Do a Tissue Culture Step 1

Bepaal wat je gaat cultiveren. De kweek kan worden uitgevoerd uit dierlijke of plantaardige weefsels. Soms wordt weefsel rechtstreeks van een plant of een dier verkregen - op andere momenten worden de cellen genomen uit een eerder gekweekte en opgeslagen cellijn.

Nieuwe cellen kunnen worden verkregen door weefsel van een levend wezen te nemen. Deze cellen staan bekend als primaire explantaten en zodra ze seniliteit bereiken stoppen ze met ontwikkelen.
Een continue cellijn doorloopt een transformatieproces dat virussen of chemische stoffen gebruikt, op een zodanige manier dat de cellen zich oneindig blijven voortplanten.

Titel afbeelding Do a Tissue Culture Step 2

Bereid het kweekmedium voor. De omstandigheden variëren afhankelijk van het celtype, maar in het algemeen moet een kweek worden uitgevoerd onder de volgende omstandigheden:

Regel de temperatuur. De ideale temperatuur hangt meestal af van het soort cellen dat u gaat groeien, maar het kan schommelen tussen 20 en 45 ºC.

Regel de pH. Waarschijnlijk schommelt de meest geschikte pH rond 6,0 en 7,5.

Beheers de osmotische druk.

Een geschikte uitwisseling van zuurstof en koolstofdioxide.

Hormonen.

Groeifactoren.

Een substraat dat de cellen voorziet van de noodzakelijke voedingsstoffen zoals aminozuren, koolhydraten, vitaminen en mineralen.

Licht. Licht is essentieel als u plantencellen wilt kweken die fotosynthese moeten uitvoeren.

Titel afbeelding Do a Tissue Culture Step 3

Bepaal welk type substraat u gaat gebruiken. Veel soorten cellen bereiken een superieure ontwikkeling wanneer ze aan een substraat worden bevestigd. Sommige van de substraten die u kunt gebruiken, zijn onder meer:

Vast of hechtend substraat. Over het algemeen zijn weefsels van organen zoals de nieren hechtend omdat ze binden aan een bindweefsel.

Substraat naar enkele of halfvaste laag. Normaal wordt in dit type cultuur een onderliggende laag in de bodem gevormd.

Teelt in suspensie. Deze klasse cellen hoeft niet te worden bevestigd aan het substraat en zich te ontwikkelen terwijl ze in omloop zijn. Vaak worden bloedcellen in suspensie gekweekt.

Deel 2

Voer de teelt uit

Titel afbeelding Do a Tissue Culture Step 4

Volg de protocollen van de fabrikant om de cultuur te starten. Er zijn verschillende bedrijven die laboratoria voorzien van de apparatuur en het materiaal dat nodig is om een gewas uit te voeren. Wanneer u het materiaal aanschaft, vindt u de protocollen om de teelt te starten. Deze protocollen beschrijven gedetailleerd hoe u het monster dat u wilt laten overbrengen naar het kweekmedium moet overbrengen. Sommige van deze bedrijven zijn bekend zoals:

Qiagen
Fisher Scientific
Thermo Scientific

Titel afbeelding Do a Tissue Culture Step 5

Voorzie de cellen van wat nodig is als u met zoogdiercellen werkt. Het is meestal nodig om het kweekmedium elke 2 of 3 dagen te herstellen. Volg de protocollen van de fabrikant om ze op de juiste manier te voeden.

Deze procedure duurt 20 minuten of minder.

Als de cellen die je hebt gegroeid niet de juiste voedingsstoffen ontvangen, zullen ze sterven.

Titel afbeelding Do a Tissue Culture Step 6

Verdeel het gewas als je merkt dat het druk begint te worden. Om de cultuur te blijven ontwikkelen, moet u sommige cellen overbrengen naar een nieuwe container met minder dichtheid. Op deze manier zullen zowel de originele als de nieuwe gewassen hun ontwikkeling voortzetten.

Je kunt sommige gewassen bevriezen voor later werk of als je de proef moet herhalen voor contaminatieproblemen. Volg de meegeleverde protocollen om de juiste temperatuur voor cryopreservatie vast te stellen of om gewassen te bevriezen.

Meer weergeven ... (5)

Delen op sociale netwerken:

Verwant